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      當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測(cè)試劑盒  -  50T節(jié)菱孢霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

      節(jié)菱孢霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

      產(chǎn)品簡(jiǎn)介

      節(jié)菱孢霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
      上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
      ACV-RAb檢測(cè)試劑盒
      用于酵母菌的培養(yǎng),及供藥品和生物制品中含王漿和蜂蜜的合劑酵母菌數(shù)測(cè)定用。(《中華人民共和國(guó)...酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(YPD)

      更新時(shí)間:2021-03-14
      訪問(wèn)次數(shù):637
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      注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

       產(chǎn)品名稱(chēng)

       節(jié)菱孢霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

       英文名稱(chēng)

       Arthrinium spp.PCR

       貨號(hào)

       LZP6379

      組成及試劑配制:
      1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
      2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
      3、 樣品稀釋液:1×20ml。
      4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
      5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
      ?
      實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
      一、試劑準(zhǔn)備
      1. DNA模板
      2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
      4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
      三、注意事項(xiàng)
      1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
      2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
      3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
      4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
      5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
      6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
      7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
      大鼠谷氨酸elisa試劑盒Anti-CD79A Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞分化 細(xì)胞骨架  

      大鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)elisa試劑盒Anti-CD79B Antibody(原貨號(hào)PB0117)研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞分化 表觀遺傳學(xué)  

      大鼠肝素結(jié)合EGF樣生長(zhǎng)因子(HBEGF)elisa試劑盒Anti-CD8 Alpha/Cd8a Antibody研究領(lǐng)域  心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶  

      大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒Anti-CD8 alpha/Cd8a Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué)  

      大鼠肥大細(xì)胞類(lèi)胰凝乳蛋白酶elisa試劑盒Anti-CD81 Antibody研究領(lǐng)域  心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 激酶和磷酸酶  

      大鼠多巴胺D2受體(D2R)elisa試劑盒Anti-CD80 Antibody研究領(lǐng)域  轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

      大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)elisa試劑盒Anti-CD79A Antibody(原貨號(hào)PB0116)研究領(lǐng)域  心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)胞類(lèi)型標(biāo)志物 細(xì)胞骨架 線(xiàn)粒體  

      大鼠胞外銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD/SOD3)elisa試劑盒Anti-CD80 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 生長(zhǎng)因子和激素 細(xì)胞膜受體  

      大鼠白介素7(IL-7)elisa試劑盒Anti-CD81 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)  

      大鼠白介素1β前體(pro-IL1B)elisa試劑盒Anti-CD81 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

      大鼠α1抗胰蛋白酶前體(pre-α1-AT)elisa試劑盒Anti-CD81 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 通道蛋白 細(xì)胞膜受體  

      魚(yú)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFB1)elisa試劑盒Anti-CD86 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 G蛋白偶聯(lián)受體 細(xì)胞表面分子 表觀遺傳學(xué)  

      魚(yú)孕激素/孕酮(PROG)elisa試劑盒Anti-CD82 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

      魚(yú)類(lèi)甲狀腺素(T4)elisa試劑盒Anti-CD82 Antibody(原貨號(hào)PB0118)研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶  

      CHL(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)說(shuō)明書(shū)Anti-CD84 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶  

      AntibioticAgarNO.2

      MMO-MUG 100(g) incubation media MMO-MUG 100(g)

      酵母提取物瓊脂 Yeast Extract Agar 250克 水中細(xì)菌總數(shù)的檢測(cè)

      快速硫化氫(H2S)試驗(yàn)瓊脂250彎曲桿菌的硫化氫試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia快速硫化氫(H2S)試驗(yàn)瓊脂250彎曲桿菌的硫化氫試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

      SodiumChlorideVioletpurpleEnrichmentBroth

      改良V-P培養(yǎng)基  V-P Medium Modified  250克  蠟樣芽孢桿菌的溶血試驗(yàn)

      R2A瓊脂  R-2A Agar  250克  飲用水中導(dǎo)生細(xì)菌分離培養(yǎng)

      A1培養(yǎng)基  A1 Medium  250克  檢測(cè)水中的大腸菌群

      酵母提取物瓊脂  Yeast Extract Agar  250克  水中細(xì)菌總數(shù)的檢測(cè)
      節(jié)菱孢霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)干擾素α6抗體8β-Tigloyloxyreysin中文名:別名:分子式:C20H26O5

      抑制細(xì)胞凋亡樣蛋白2抗體Eucannabilide中文名:別名:Hiyodorilactone A分子式:C22H28O8

      干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1抗體(神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白PC4)Globulol中文名:藍(lán)桉醇別名:分子式:C15H26O

      E3泛素蛋白連接酶144B/環(huán)指蛋白144B抗體Bakkelide B中文名:蜂斗菜內(nèi)酯B別名:Fukilide分子式:C22H30O6

      胰島素樣生長(zhǎng)因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白1抗體8β-(4-Acetoxy-5-hydroxytigloyloxy)costulide中文名:別名:分子式:C22H28O7
      檢測(cè)步驟:
      一、 試劑的準(zhǔn)備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
      試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
      熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
      7.2 qPCR反應(yīng)條件
      將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
      推薦循環(huán)條件:
      1循環(huán) 50℃ for 2 min
      預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
      PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

       

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