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      產(chǎn)品中心

      Product Center

      當前位置:首頁  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測試劑盒  -  50T小麥PCR檢測試劑盒規(guī)格

      小麥PCR檢測試劑盒規(guī)格

      產(chǎn)品簡介

      硝呋酚酰肼別名:分子式:C12H9N3O5

      叉頭蛋白J1抗體Prasugrel中文名:普拉格雷別名:分子式:C20H20F3S

      腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體Fexofenadine hydrochloride中文名:鹽酸非索非那定別名:分子式:C32H40Cl4

      更新時間:2021-03-13
      訪問次數(shù):516
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      組成及試劑配制:
      1、酶標板:一塊(96孔)
      2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
      3、 樣品稀釋液:1×20ml。
      4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
      5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
      注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

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       產(chǎn)品名稱

       小麥PCR檢測試劑盒規(guī)格

       規(guī)格

       50T

       貨號

       LZP7840

      實驗過程:
      一、試劑準備
      1. DNA模板
      2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
      4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
      三、注意事項
      1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
      2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
      3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
      4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
      5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
      6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
      7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
      一、 試劑的準備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
      試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
      熒光PCR反應液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
      7.2 qPCR反應條件
      將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
      推薦循環(huán)條件:
      1循環(huán) 50℃ for 2 min
      預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
      PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
      石油(for GC,用于環(huán)境分析)Phospho-FoxO1 (Thr24)/FoxO3a (Thr32)/FoxO4 (Thr28) (4G6) Rabbit mAb1-(甲氧基基)哌

      季戊四(色譜固定液,150℃)Phospho-FoxO1 (Thr24)/FoxO3a (Thr32)/FoxO4 (Thr28) (4G6) Rabbit mAb雙酰酮基二丁基錫

      (農(nóng)殘級)Phospho-HP1γ (Ser83) Antibody阿卡波糖

      異硫酸酯(99%,用于HPLC標記)Phospho-PAK1 (Thr423)/PAK2 (Thr402) Antibody溴五氟

      正戊烷(農(nóng)殘級)Phospho-PAK1 (Thr423)/PAK2 (Thr402) Antibody5-吡啶-2-

      聚酰粉(柱層析用)PAK1 Antibody1-(2-氟基)哌

      (色譜級, 85-90%)PAK1 Antibody戊

      聚酰粉(柱層析用,200-400目)CD8α (RPA-T8) Mouse mAb (APC-Cy7® Conjuga)甲氧基-甲氧基羰基酸

      聚酰粉(柱層析用,10-30目)AMPKα (23A3) Rabbit mAb4,5-二噠-3(2H)-酮

      酸氫二鈉,二水(for HPLC, ≥99%(T))PAK1/2/3 Antibody2,6-二羥基酮

      高酸鈉,一水(色譜級,≥99.0%(T))PAK1/2/3 Antibody間甲磺酰

      無水硫酸鈉(農(nóng)殘級)Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) Antibody磺酰

      無水硫酸鈉(for HPLC,≥99.0%(T))Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) Antibody氟試劑

      碳酸氫鈉(for HPLC,≥99.0%)Phospho-PAK1 (Ser144)/PAK2 (Ser141) Antibody奎諾二甲基酸酯

      四丁基酸二氫銨(HPLC)Phospho-PAK1 (Ser144)/PAK2 (Ser141) Antibody氘代氫化鋰鋁

      四己基硫酸氫銨(用于離子色譜,≥99.0%(T))Phospho-PAK2 (Ser20) Antibody溴甲基-5-并噻吩

      三鹽酸鹽(for HPLC,≥99.0%)Phospho-PAK2 (Ser20) Antibody聯(lián)二噻吩

      四甲基硫酸氫銨(99%)PAK2 Antibody五氟甲

      alpha突觸核蛋白(淀粉樣前體非A4成分蛋白)低聚物(SNCA oligomer)ELISA試劑盒NAP1/NAP1L1  核小體組裝蛋白1100 ul

      Alpha-D 酚/維生素E(Alpha-D TPL)ELISA試劑盒NB3/CNTN6  神經(jīng)細胞NB3特定蛋白100 ul

      alpha-1腎上腺素能受體(ADRA1)IgGELISA試劑盒P95/NBS1  DNA修復蛋白NBS1100 ul

      AFG3樣蛋白2(AFG3L2)ELISA試劑盒Phospho-p95/NBS1 (Ser343)  酸化DNA修復蛋白NBS1100 ul

      Adropin(ENHO)ELISA試劑盒N-cadherin  N-鈣粘附分子100 ul

      ADP-核糖基化因子5(ARF5)ELISA試劑盒E-cadherin  上皮鈣粘附分子100 ul

      ADP-核糖基化因子4(ARF4)ELISA試劑盒Nck1/Nck2  NCK銜接因子蛋白2100 ul

      ADAM金屬肽酶含血小板反應蛋白1基元4(ADAMTS4)ELISA試劑盒NCOA2/KAT13C  核受體輔助激活蛋白220 ul

      8異F2α(8-iso-PGF2a)ELISA試劑盒NCoR1  核受體輔助抑制因子1100 ul
      小麥PCR檢測試劑盒規(guī)格脆性組氨酸三聯(lián)體抗體Baclofen中文名:巴氯芬別名:分子式:C10H12Cl2

      纖維母細胞表面蛋白抗體1-(4-(3-Chloropropoxy)-3-methoxyphenyl)ethane中文名:別名:分子式:C12H15ClO3

      卵泡抑素抗體Nifuroxazide中文名:硝呋酚酰肼別名:分子式:C12H9N3O5

      叉頭蛋白J1抗體Prasugrel中文名:普拉格雷別名:分子式:C20H20F3S

      腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體Fexofenadine hydrochloride中文名:鹽酸非索非那定別名:分子式:C32H40Cl4

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