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      產(chǎn)品中心

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      當(dāng)前位置:首頁  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測(cè)試劑盒  -  50T軍團(tuán)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

      軍團(tuán)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

      產(chǎn)品簡(jiǎn)介

      軍團(tuán)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格
      上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
      維生素 D3 ((膽骨化)C34H30O15-2-溴甲

      分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒CD9/MRP-1 CD9蛋白100 ul

      分泌型脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒CD40L CD40L100 ul

      肺炎支原體顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

      更新時(shí)間:2021-03-13
      訪問次數(shù):486
      詳細(xì)介紹在線留言

      注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

       產(chǎn)品名稱

       軍團(tuán)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

       規(guī)格

       50T

       貨號(hào)

       LZP7636

      組成及試劑配制:
      1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
      2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
      3、 樣品稀釋液:1×20ml。
      4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
      5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
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      實(shí)驗(yàn)過程:
      一、試劑準(zhǔn)備
      1. DNA模板
      2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
      4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
      三、注意事項(xiàng)
      1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
      2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
      3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
      4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
      5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
      6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
      7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
      索拉非尼C22H28N2O4辛酸酯

      二酸組;酸組C17H24O52-氨基-5-溴-羥基嘧啶

      酸喹,喹二酸鹽C19H26O72,6-二甲

      (-)-莨菪,L-天仙子,L-天仙子C20H24O72H-2-酸 -1,2,三氮唑

      (-)-莨菪,L-天仙子,澳洲毒茄(標(biāo)準(zhǔn)品)C20H18O10對(duì)甲氧基

      葡聚糖D70/右旋糖苷C7H7NO2并噻唑-2-

      右旋糖苷/葡聚糖D40C44H64O242-基-

      葡聚糖D20/右旋糖苷C22H33NO25-溴-1-甲基-1,2,噻唑

      沙格列汀/沙克列汀鹽酸鹽C24H39NO62-氟-5-吡啶酸

      表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG95%)C46H58N4O92--甲基-5-溴吡啶

      達(dá)沙替尼一水合物C7H6O4L-甲氧基扁桃酸

      依西美坦C8H8O21,2-二

      依西美坦(標(biāo)準(zhǔn)品)C7H6O31-氨基-2-甲基-2-

      氨基比林C5H4O3基香蘭素縮

      馬來酸那敏/撲爾敏C40H56O2間異酸酯

      馬來酸那敏/撲爾敏(標(biāo)準(zhǔn)品)C36H36N2O8N-甲基-甲氧基芐

      血管緊張素IIC21H20O10-三氟

      維生素 D3 ((膽骨化)C34H30O15-2-溴甲

      分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒CD9/MRP-1  CD9蛋白100 ul

      分泌型脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒CD40L  CD40L100 ul

      肺炎支原體(MP)(IgG)ELISA試劑盒Ingrin alpha 2b/CD41  血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa100 ul

      肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒CD43/SPN  CD431 Kit

      肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒CD44/PGP1  CD44100 ul

      肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒CD44v4  CD44V4100 ul

      肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒CD44v5  CD44V5100 ul

      肺表面活性蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒CD44v6  CD44V6100 ul

      肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)ELISA試劑盒CD44v7  CD44V71 Kit
      軍團(tuán)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格腫瘤/抗原家族4亞型7抗體Cynaside F中文名:別名:分子式:C41H62O15

      神經(jīng)細(xì)胞膜糖蛋白M6bPeriplocoside F中文名:別名:Periploside F分子式:C63H104O23

      FK506結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白抗體(他克莫司相關(guān)蛋白)7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol中文名:別名:5α,6α-Epoxy-7α-methoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol分子式:C29H46O3

      G蛋白偶聯(lián)受體激酶5抗體Minisecolide C中文名:別名:分子式:C28H34O7

      磷酸化糖原合酶激酶-3α抗體Withaphysalin A中文名:別名:分子式:C28H34O6
      檢測(cè)步驟:
      一、 試劑的準(zhǔn)備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
      試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
      熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
      7.2 qPCR反應(yīng)條件
      將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
      推薦循環(huán)條件:
      1循環(huán) 50℃ for 2 min
      預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
      PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

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