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      極細密螺旋體PCR檢測試劑盒規(guī)格

      產品簡介

      極細密螺旋體PCR檢測試劑盒規(guī)格
      上海聯(lián)祖生物相關產品:
      SRP檢測試劑盒 確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100。

      更新時間:2021-03-13
      訪問次數:437
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      組成及試劑配制:
      1、酶標板:一塊(96孔)
      2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
      3、 樣品稀釋液:1×20ml。
      4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
      5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
      注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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       產品名稱

       極細密螺旋體PCR檢測試劑盒規(guī)格

       英文名稱

       Treponema pertenuePCR

       貨號

       LZP7396

      實驗過程:
      一、試劑準備
      1. DNA模板
      2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
      4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
      三、注意事項
      1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
      2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
      3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
      4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
      5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
      6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
      7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
      一、 試劑的準備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
      試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
      熒光PCR反應液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
      7.2 qPCR反應條件
      將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
      推薦循環(huán)條件:
      1循環(huán) 50℃ for 2 min
      預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
      PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
      N-Fmoc-L-Asparagine胰蛋白酶抑制劑 試劑級4-溴聯(lián)苯 分析標準品

      Fmoc-Gln-OH乙酸雙氧鈾 ACS級3-溴聯(lián)苯  分析標準品

      Fmoc-Asn-OH二甲苯青FF 分子生物學級3-溴聯(lián)苯  97%

       Fmoc-D-Asn-OH2,2-雙(羥甲基)酸 98%高精度150KG電子稱(上海恒器廠) 大稱量150KG,精度10G

      Fmoc-Gly-OH2,3-二溴丁二酸 98%對溴苯酚 98%

      Fmoc-lle-OH2,2,2-三氯乙酰胺 98%對溴苯胺 99%

      Fmoc-Leu-OH1,4-環(huán)己二酮 98%2-溴苯酚 99%

      Fmoc-D-Leu-OH甲基-а-D-吡喃半乳糖苷 98%2-溴苯酚 分析標準品,99.5%(HPLC)

      Fmoc-Met-OHN-氨酰甲基乙磺酸 99%鄰甲氧基苯甲酸 99%

      Fmoc-D-Met-OHN-氨酰甲基乙磺酸 ≥99.5% (T)1,3,5-三溴苯 99%

      Fmoc-Pro-OHADA二鈉鹽 98%葡萄糖酸鈣 99%

      Fmoc-D-Pro-OHN-胺基嗎啉 98%葡萄糖酸亞鐵 USP級

      Fmoc-Ser-OHN-(2-乙酰胺基)-2-亞氨基二乙酸 BC,99%葡萄糖酸鋅 98%

      Fmoc-D-Ser-OHN-(2-乙酰胺基)-2-亞氨基二乙酸 超純級 過氧化氫異苯 80-85 %

      Fmoc-Hyp-OHADA 單鈉鹽 99%2,4-二氨苯 CP

      Fmoc-Thr-OH十二烷基二甲基氯化銨 99%2,4-二氨苯 98%

      精乙基噁唑禾草靈(標準品)XLF Antibodyox-LDL  氧化低密度脂蛋白抗體

      Amberlite® IRC-748螯合型離子交換樹脂Phospho-4E-BP1 (Thr37/46) (236B4) Rabbit mAbOXCT1  含氧酸輔酶A轉移酶1抗體

      Amberlyst15離子交換樹脂(濕)Phospho-4E-BP1 (Thr37/46) (236B4) Rabbit mAbOVCA2  卵巢癌相關基因2蛋白抗體

      Amberlyst 15離子交換樹脂(干)Phospho-4E-BP1 (Thr37/46) (236B4) Rabbit mAbOVCA1  卵巢癌相關基因1抗體

      Amberlite® IRA-900 陰離子交換樹脂Phospho-DUSP1/MKP1 (Ser359) (125E2) Rabbit mAbOVA/SerpinB8  雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體

      乙酰磷(標準品)eIF4GI AntibodyOTUB1  泛素特異性蛋白酶OTB1抗體

      乙酰磷標準溶液(10μg/ml,基體:酮)Phospho-IκBα (Ser32) (14D4) Rabbit mAbOTUB  泛素特異性蛋白酶Otubain2抗體

      Amberlite® XAD16非離子型大孔樹脂(20-60 mesh)Phospho-IκBα (Ser32) (14D4) Rabbit mAbOtoraplin/OTOR/Fibrocyte derived protein  纖維細胞源性蛋白

      甲草胺(標準品)Phospho-IκBα (Ser32) (14D4) Rabbit mAbOTOA/DFNB22  耳聾、常染色體隱性遺傳22抗體

      甲草胺標準溶液(100μg/ml,u=3%)p190-A RhoGAP (C59F7) Rabbit mAbOTC  鳥氨酸氨酰轉移酶抗體
      極細密螺旋體PCR檢測試劑盒規(guī)格淀粉樣肽前體蛋白抗體6-Hydroxyisosativan中文名:別名:分子式:C17H18O5

      血管緊張素原抗體Derrisisoflavone I中文名:別名:分子式:C26H26O7

      雄激素受體抗體Derrisisoflavone K中文名:別名:分子式:C22H22O6

      自分泌運動因子抗體Derrisisoflavone H中文名:別名:分子式:C26H26O7

      細胞死亡調節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑)Derrisisoflavone J中文名:別名:分子式:C22H22O6

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