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      當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測(cè)試劑盒  -  50T同斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

      同斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

      產(chǎn)品簡(jiǎn)介

      同斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格
      上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
      CDK-7檢測(cè)試劑盒微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋

      更新時(shí)間:2021-03-13
      訪問(wèn)次數(shù):513
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      組成及試劑配制:
      1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
      2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
      3、 樣品稀釋液:1×20ml。
      4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
      5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
      注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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       產(chǎn)品名稱(chēng)

       同斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

       英文名稱(chēng)

       Penaeus Monodontype Baculovirus(MBV,WSSV)PCR

       貨號(hào)

       LZP7120

      實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
      一、試劑準(zhǔn)備
      1. DNA模板
      2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
      4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
      三、注意事項(xiàng)
      1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
      2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
      3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
      4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
      5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
      6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
      7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測(cè)步驟:
      一、 試劑的準(zhǔn)備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
      試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
      熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
      7.2 qPCR反應(yīng)條件
      將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
      推薦循環(huán)條件:
      1循環(huán) 50℃ for 2 min
      預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
      PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
      4-Nitrophenyl α-D-manpyraside四溴鈀酸 Pd ≥20.5%亞鐵化鈉 CP

      ADPG銠粉 99.99% metals basis原甲酸*酯 98%

      RuDP氧化銠,合 銠 55%原甲酸三乙酯 99%

      Acarbose氯亞鉑酸鈉 Pt 44.5%氟化銨 AR,98%

      Methyl β-D-glucopyraside四氯鈀酸鈉  98%氟化銨 GR,98%

      D-(+)-Sorbose六氯代鉑酸鈉六合物 Pt 34.0%氟化氫銨 AR,98.5%       

      Moacetone glucose氯金酸鈉 金含量,48%  AR,40.0%

      Kuromanin chloride硫酸銠溶液 80g(Rh)/L溶液氟酸 AR,40.0%

      2-(Chloromethyl)-4-(4-nitrophenyl)-1,3-thiazole四氨合氯化鉑 合物 98%氟酸 CP,40.0%

      2-Deoxy-L-ribose四(三苯基膦)鉑 Pt 15.2%氟酸 49.5-50.5%溶液

      L-(−)-Glucose乙酸戊酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)氨基胍碳酸氫鹽 98.5%

      Chlorophyllin乙酸戊酯 AR,99.00%三氧化二銻 99.99% metals basis

      Chlorophyll乙酸戊酯 CP,98.5% 三氧化二銻 AR,99.5%

      Chlorophyll B茴香 98%重去甲腎上腺素 ≥98%(HPLC),USP

      Chlorophyll A乙縮 CP,97%L-去甲腎上腺素 98%

      Crystal violet乙縮 Standard for GC,>99%(GC)辛弗林 98%

      納他霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Drebrin A AntibodyRIAM/APBB1 interacting protein 1  β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體

      硝苯地平Di-Methyl-Histone H3 (Lys27) (D18C8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)rHPV  重組人瘤病毒抗體

      硝苯地平(標(biāo)準(zhǔn)品)TPX2 (D2R5C) XP® Rabbit mAbRHOBTB1  Rho相關(guān)結(jié)構(gòu)域BTB蛋白質(zhì)1抗體

      尼莫地平Skp1 (D3J4N) Rabbit mAbRhoA  RhoA抗體

      尼莫地平(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-M-CSF Receptor (Tyr699) (D10B11) Rabbit mAbRho C  RhoC抗體

      硝唑尼特CPT1A (D3B3) Rabbit mAbrhIL-18  重組人白細(xì)胞介素18抗體

      硝唑尼特(標(biāo)準(zhǔn)品)Plectin-1 (D6A11) Rabbit mAbRHEB  Ras蛋白腦組織同源類(lèi)似物RHEB蛋白抗體

      寡霉素ALamin B2 (D8P3U) Rabbit mAbRHCG  RH血型C糖蛋白抗體

      鹽酸奧洛他定SignalSilence® c-Raf siRNA IRHCE  Rh血型C抗原抗體

      鹽酸奧洛他定(標(biāo)準(zhǔn)品)E2A (D2B1) Rabbit mAbRHBDD3  垂體瘤細(xì)胞凋亡抗體
      同斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格人抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

      人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100毫克

      人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

      人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

      人柯薩奇病毒IgG(CoxV-IgG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100毫升

      人柯薩奇病毒IgM(CoxV-IgM)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光10克

      人顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2000u

      人顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:10KU

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