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      梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒價格

      產(chǎn)品簡介

      梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒價格
      上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
      HLAMP-2檢測試劑盒
      P-selectin P選擇素抗原
      CD63/MLA1 溶酶體膜糖蛋白抗原
      MRS肉湯培養(yǎng)基
      MUGal(4-甲基傘形酮-β-半乳萄糖苷)肉湯
      MUG培養(yǎng)基
      MUG營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
      OF(Hugh-leifson)
      OXA瓊脂平板(牛津瓊脂平板)
      PALCAM瓊脂凍干配套試劑

      更新時間:2021-03-14
      訪問次數(shù):556
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      ?
      注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

       產(chǎn)品名稱

       梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒價格

       英文名稱

       Clostridium estertheticum PCR

       貨號

       LZP6585

      實驗過程:
      一、試劑準備
      1. DNA模板
      2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
      4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
      三、注意事項
      1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
      2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
      3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
      4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
      5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
      6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
      7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
      一、 試劑的準備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
      試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
      熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
      7.2 qPCR反應(yīng)條件
      將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
      推薦循環(huán)條件:
      1循環(huán) 50℃ for 2 min
      預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
      PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
      組成及試劑配制:
      1、酶標板:一塊(96孔)
      2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
      3、 樣品稀釋液:1×20ml。
      4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
      5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
      靈芝酸C6實驗步驟Anti-SMAD5 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 染色質(zhì)和核信號 表觀遺傳學

      棉酚303-45-7價格Anti-SMAD5 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學

      10-姜酚23513-15-7價格Anti-SMAD6 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)

      13-去羥基印烏堿實驗步驟Anti-SMARCA2 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白信號

      扁蓄苷572-30-5實驗方法Anti-SMAD9 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白信號

      常春藤苷D760961-03-3 *Anti-SMC3 Antibody(原貨號PB0789)研究領(lǐng)域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白信號

      大黃酸478-43-3實驗方法Anti-SMARCAD1 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學 表觀遺傳學

      丹參酮 I568-73-0*Anti-SMARCA4 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學 細胞類型標志物

      漢防己甲素518-34-3*Anti-SMC4 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶

      甘草查爾酮A58749-22-7  實驗方法Anti-SMN1/2 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學

      橄欖苦甙32619-42-4實驗步驟Anti-SMOX Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學 表觀遺傳學

      高車前素1447-88-7 價格Anti-SMC6 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學

      哈巴苷6926-08-5 實驗方法Anti-SMTN Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學

      積雪草苷16830-15-2 *Anti-SMURF1 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學

      咖啡酸331-39-5*Anti-SMURF2 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學

      3-溴-1-苯并呋喃  甲基丙烯酰氧乙基*基化銨  5-羧基苯并三唑

      7-二乙基-4-甲基  2-甲基-3-丁烯-2-醇  2-[2-(1-基)乙氧基]乙醇

      2--4-甲氧基  乙酸乙酯  3-

      2-溴-1--4-苯  二茂鐵  1-(4-苯基)-4,4-二甲基-3-戊

      Food green 3  固綠FCF  2353-45-9

      Bromocresol green  溴甲酚綠  76-60-8

       Red  紅  117-92-0

      4-Morpholineethanesulfonic acid  嗎啉乙磺酸  4432-31-9

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