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      節(jié)狀古柏線蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格

      產(chǎn)品簡介

      節(jié)狀古柏線蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格
      上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
      ILTsR/LIR/CD85檢測試劑盒
      PERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase) 蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗原
      FSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein) 纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線

      更新時間:2021-03-14
      訪問次數(shù):510
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      注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

       產(chǎn)品名稱

       節(jié)狀古柏線蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格

       英文名稱

       Cooperia oncophoraPCR

       貨號

       LZP6604

      實驗過程:
      一、試劑準(zhǔn)備
      1. DNA模板
      2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
      4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
      三、注意事項
      1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
      2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
      3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
      4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
      5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
      6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
      7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
      一、 試劑的準(zhǔn)備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
      試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
      熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
      7.2 qPCR反應(yīng)條件
      將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
      推薦循環(huán)條件:
      1循環(huán) 50℃ for 2 min
      預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
      PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
      組成及試劑配制:
      1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
      2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
      3、 樣品稀釋液:1×20ml。
      4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
      5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
      比布里希猩紅使用說明書Anti-TGM2 Antibody研究領(lǐng)域  神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞骨架 細(xì)胞膜蛋白

      吖啶紅保存Anti-TGM2 Antibody(原貨號PB0469)研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

      磺酰羅丹明B使用說明書Anti-TH Antibody(原貨號PB0470)研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué)

      茜素藍(lán)S保存Anti-THBS1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)胞膜受體

      雙向電泳指示劑使用說明書Anti-THBS1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞骨架

      5(6)-羧基二乙酸熒光素琥珀酰亞胺酯價格Anti-THBS2 Antibody研究領(lǐng)域  神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞骨架

      蜜二糖使用說明書Anti-THBS1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 干細(xì)胞 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞骨架 細(xì)胞外基質(zhì)

      蘇糖實驗步驟Anti-THBS2 Antibody研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞類型標(biāo)志物

      葡糖酸內(nèi)酯實驗步驟Anti-THPO Antibody研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞類型標(biāo)志物

      十二烷基-β-D-麥芽糖苷價格Anti-THPO Antibody研究領(lǐng)域  神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶

      膽固醇乙酸脂價格Anti-THPO Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子

      2-雙(2-羥基)氨基-2-(羥甲基)-1,3-丙二醇鹽酸鹽實驗步驟Anti-THPO Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞周期蛋白

      馬鈴薯淀粉實驗步驟Anti-Thrombospondin/THBS1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 結(jié)合蛋白

      癸基吡喃葡萄糖苷價格Anti-THY1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)

      維生素C鈉使用說明書Anti-THY1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)

      2,4-二羥基-3-甲基  2--4-甲氧基苯  1-羥基苊

      5-溴-4-甲基-1H-吲唑  4-乙炔基苯甲醚  (S)-(+)-1-基茚

      3-乙酰基-7(1H)-氮雜吲哚  咪唑并[1,2-b]噠嗪  5-基茚旦

      2-溴-1,3-二-5-苯  4-乙基苯乙炔  1-基芘

      Isoprothiolane  稻瘟靈  50512-35-1

      Tetra-n-butyltin  四丁基錫  1461-25-2

      OCTYLTRICHLOROTIN  乙辛基三化錫  3091-25-6

      acetic acid, mercaptophenyl-, ethyl ester, s-ester with o,o-dimethyl phosphorod    13376-78-8

      大鼠硬脂酰輔酶A去飽和酶1(SCD1)ELISA試劑盒 ,英文名: SCD1 ELISA Kit

      人免疫球蛋白輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)ELISA檢測試劑盒Humankappaimmuglobulinlightchain,κ-IgLCELISAKit 96T/48T

      大鼠白介素12(IL-12/P40)免疫試劑盒 Rat Ierleukin 12,IL-12/P40 ELISA KIT

      CLIAKitfoARC/CCL17(Humahymusactivatioegulatedchemokine)ELISAKit人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子規(guī)格:48T/96T

      人體MethylteahydrofolatereductaseRFLP基因分析試劑盒20次

      ELISAKitARPA/Rib-P人抗核糖體P蛋白抗體規(guī)格:48T/96T
      節(jié)狀古柏線蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA試劑盒英文名稱:Rat soluble Toll-like receptor 2,sTLR-2 ELISA Kit進口/原裝

      大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA試劑盒英文名稱:Rat soluble Toll-like receptor 6,sTLR-6 ELISA Kit進口/分裝

      大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒英文名稱:Rat soluble Interleukin 6 receptor,sIL-6R ELISA Kit進口/分裝

      大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)ELISA試劑盒英文名稱:Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 ELISA Kit*

      大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒英文名稱:Rat soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit進口/分裝

      人肺炎支原體抗體(MP-Ab)ELISA Ki英文名稱:Human Mycoplasma pneumoniae antibody,MP-Ab ELISA Kit進口/原裝

      人分泌成分(SC)ELISA試劑盒英文名稱:Human secretory component,SC ELISA Kit*

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