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      當(dāng)前位置:首頁  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測試劑盒  -  50T馬巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒說明書

      馬巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒說明書

      產(chǎn)品簡介

      馬巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒說明書
      上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
      小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測 檢測試劑盒
      氟胺磺隆(含干冰運(yùn)輸費(fèi))
      正十六烷
      甲酸(蟻酸)
      3,5-二苯酚

      更新時間:2021-03-14
      訪問次數(shù):654
      詳細(xì)介紹在線留言

      注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

       產(chǎn)品名稱

       馬巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒說明書

       英文名稱

       Babesia equiPCR

       貨號

       LZP6423

      組成及試劑配制:
      1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
      2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
      3、 樣品稀釋液:1×20ml。
      4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
      5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
      ?
      實(shí)驗過程:
      一、試劑準(zhǔn)備
      1. DNA模板
      2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
      4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
      三、注意事項
      1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實(shí)驗室。
      2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
      3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
      4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
      5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續(xù)性。
      6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
      7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
      CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)elisa試劑盒Anti-ENG Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 細(xì)胞類型標(biāo)志物  

      A激酶PRKA錨定蛋白12(Akap12)elisa試劑盒Anti-ENG Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞類型標(biāo)志物 細(xì)胞膜蛋白  

      Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)elisa試劑盒Anti-ENO1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞類型標(biāo)志物  

      Ⅱ型膠原代謝產(chǎn)物C2C(C2C)elisa試劑盒Anti-ENO2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 細(xì)胞類型標(biāo)志物  

      牛胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)elisa試劑盒Anti-ENO2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白  

      牛一氧化氮(NO)elisa試劑盒Anti-EP300 Antibody(原貨號PB0163)研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 新陳代謝  

      綿羊二醇受體(ER-Alpha)elisa試劑盒Anti-EOMES Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號  

      雞凋亡相關(guān)因子(FAS)elisa試劑盒Anti-Epac1/RAPGEF3 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞類型標(biāo)志物  

      β干擾素(IFN-β/IFNB)elisa試劑盒Anti-EPAS1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號  

      大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)elisa試劑盒Anti-EPB41L1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)  

      大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)elisa試劑盒Anti-EPB41L1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 細(xì)胞表面分子 細(xì)胞類型標(biāo)志物  

      大鼠精胺脲水解酶(AGMAT)elisa試劑盒Anti-EPAS1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 新陳代謝  

      大鼠金屬硫蛋白(MT)elisa試劑盒Anti-EPB41L5 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 結(jié)合蛋白 表觀遺傳學(xué)  

      大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa試劑盒Anti-EPCAM Antibody(原貨號PB1115)研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

      大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)elisa試劑盒Anti-EPHA1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

      CelluloseCongRedMedium

      Mannitol Salt Agar incubation media Mannitol Salt Agar

      長根菇 /瓶

      BrucellaBroth

      甘露醇鹽瓊脂(新藥典) 250g 金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)

      改良酵母浸汁-孟加拉紅肉湯  Modified Yeast Extract-Rose Bengal Broth  250克  小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌冷增菌培養(yǎng)

      乳酸菌液體培養(yǎng)基  Lactobacillus Fluid Medium  250克  檢測乳酸桿菌

      胺藍(lán)-DNA酶瓊脂  Toluidine Blue-O-Dnase Agar  100克  核糖核酸酶測定

      中國藍(lán)薔薇酸瓊脂  中國藍(lán)薔薇酸瓊脂  250克
      馬巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒說明書Rho GTP酶激活蛋白15抗體6-Formyl-1,2,9,10-tetramethoxy-6a,7-dehydroaporphine中文名:別名:分子式:C21H215

      抑癌基因結(jié)合蛋白ARID1B抗體Thalidezine中文名:別名:分子式:C38H42N2O7

      E3連接酶蛋白ARIH2抗體Uncarine A中文名:鉤藤堿 A別名:Isoformosanine分子式:C21H24N2O4

      ADP核糖基化樣因子1抗體Thalifoline中文名:別名:分子式:C11H133

      ADP核糖基化因子樣蛋白4抗體Thalrugosidine中文名:別名:分子式:C38H42N2O7
      檢測步驟:
      一、 試劑的準(zhǔn)備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
      試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
      熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
      7.2 qPCR反應(yīng)條件
      將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
      推薦循環(huán)條件:
      1循環(huán) 50℃ for 2 min
      預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
      PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

       

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