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      當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測(cè)試劑盒  -  50T斑點(diǎn)氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家

      斑點(diǎn)氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家

      產(chǎn)品簡(jiǎn)介

      斑點(diǎn)氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家
      上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
      ACS檢測(cè)試劑盒
      二氫石蒜堿
      二氫醉椒素
      番茄紅素

      更新時(shí)間:2021-03-14
      訪問(wèn)次數(shù):776
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      注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

       產(chǎn)品名稱

       斑點(diǎn)氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家

       英文名稱

       Aeromonas punctataPCR

       貨號(hào)

       LZP6346

      實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
      一、試劑準(zhǔn)備
      1. DNA模板
      2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
      4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
      三、注意事項(xiàng)
      1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
      2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
      3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
      4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
      5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
      6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
      7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測(cè)步驟:
      一、 試劑的準(zhǔn)備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
      試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
      熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
      7.2 qPCR反應(yīng)條件
      將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
      推薦循環(huán)條件:
      1循環(huán) 50℃ for 2 min
      預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
      PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
      組成及試劑配制:
      1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
      2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
      3、 樣品稀釋液:1×20ml。
      4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
      5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
      大鼠肝X受體β(LXRβ)elisa試劑盒Anti-AQP9 Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)

      大鼠蛋白激酶C(PKC)elisa試劑盒Anti-AQP9 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 免疫學(xué) 激酶和磷酸酶 糖尿病

      大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)elisa試劑盒Anti-AQP9 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物

      大鼠丙二醛(MDA)elisa試劑盒Anti-AR Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝

      大鼠白介素33(IL-33)elisa試劑盒Anti-ARAF Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

      大鼠白介素22(IL-22)elisa試劑盒Anti-ARC Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 細(xì)胞凋亡

      F81(貓腎細(xì)胞)現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-ARG1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶

      A549(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)價(jià)格Anti-AREG Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡

      人結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基報(bào)價(jià)Anti-ARG1 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

      表告依春1072-93-1*Anti-ARFGAP1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞骨架

      L-甲狀腺素鈉五水物價(jià)格Anti-ARF6 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞骨架

      L-高苯丙氨酸價(jià)格Anti-ARG2 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

      豬高鐵血紅蛋白(MHB)elisa試劑盒Anti-ARHGEF1 Antibody(原貨號(hào)PB1099)研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)胞類型標(biāo)志物 自然殺傷細(xì)胞 t-淋巴細(xì)胞

      豬高爾基蛋白73(GP-73)elisa試劑盒Anti-ARG1 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)胞膜受體

      小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG2)elisa試劑盒Anti-ARG2 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)

      抗生素檢定培養(yǎng)基2號(hào)(低PH)(05藥典)250g四環(huán)素,土霉素等效價(jià)測(cè)定

      MUG營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA -MUG) 100(g) incubation media MUG營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA -MUG) 100(g)

      A1培養(yǎng)基 A1 Medium 250克 檢測(cè)水中的大腸菌群

      馬尿酸鈉培養(yǎng)基于彎曲桿菌的馬尿酸鈉水解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia馬尿酸鈉培養(yǎng)基于彎曲桿菌的馬尿酸鈉水解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

      氯結(jié)晶紫增菌液 250g 副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))

      胰酪胨大豆肉湯  TSB  250克  一種通用的微生物營(yíng)養(yǎng)增菌肉湯,也可金黃色葡萄球菌的MPN測(cè)定和生產(chǎn)線無(wú)菌灌裝試驗(yàn)

      胰酶大豆瓊脂  TSA  250克  生物制品的無(wú)菌試驗(yàn)

      胰胨大豆瓊脂斜面  Tryptic Soy Agar  250克  培養(yǎng)副溶血性弧菌,做細(xì)胞色素氧化酶實(shí)驗(yàn)

      堿性蛋白胨水  AP  250克  增殖霍亂弧菌及付霍亂弧菌
      斑點(diǎn)氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體Stachybotrylactam中文名:別名:分子式:C23H314

      γ干擾素誘導(dǎo)蛋白202抗體Breyniaioside A中文名:別名:分子式:C19H32O9

      整合素連接激酶-1抗體8α-Hydroxyhirsutilide中文名:別名:分子式:C15H20O6

      生長(zhǎng)抑制因子基因1抗體Chartarlactam A中文名:別名:分子式:C23H295

      干擾素alpha 7蛋白抗體Bakkelide D中文名:蜂斗菜內(nèi)酯D別名:分子式:C21H28O6S

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